请教小鼠原代脂肪干细胞的形态及分离培养条件

小鼠脂肪来源干细胞的分离、培养及鉴定

脂肪来源干细胞（Adipose-DerivedStemCells,ADSCs)作为组织工程的种子细胞正受到越来越多的关注。 本实验采用一次消化多次收集与差速贴壁法分离小鼠腹股沟及附睾脂肪组织中的ADSC。通过倒置显微镜观察ADSC的一般形态；透射电子显微镜观察ADSC的超微结构；流式细胞术及激光共聚焦显微镜检测ADSC表面标志；利用特定的诱导液诱导ADSC分化及利用扫描电子显微镜观察ADSC与胶原支架的相容性。 结果显示ADSC呈长梭形或成纤维细胞样，旋涡状或束状交叉生长。ADSC细胞体积大，胞质内含有线粒体及粗面内质网等细胞器。ADSC的生长符合干细胞的生长规律，并可在体外稳定传至第9代。ADSC表达CD44及CD29，不表达CD34。成骨诱导剂诱导后，细胞内碱性磷酸酶表达量增加，细胞基质发生钙化。成脂肪诱导剂诱导后，细胞质内可见较多小脂滴。说明ADSC具有分化为成骨细胞及脂肪细胞的潜能。ADSC能够在胶原支架上铺展生长，说明其与胶原支架具有良好的相容性。 本实验建立了分离、培养小鼠ADSC的技术方法，为将来利用小鼠ADSC进行皮肤、肌腱、血管及神经组织修复的动物实验研究提供了前期实验基础和技术支持。