-20度或者-80度能保存更长时间，4度保存，有效成分更易出现降解。但只要买来时的质量是合格的，4度放一周，应该可以继续使用；以前也不小心试过，但尽量不要这样。另外，可以这么想，平时将血清加到MEM或DMEM等培养基里，不会马上用完，在4度放一两周还是可以的，养的细胞状态也都ok。所以不用担心，但尽量避免这样。
细胞冻存1.预先配制冻存液：10%DMSO+90%胎牛血清,4℃冰箱保存预冷；2.用胰酶对细胞进行消化：倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基,PBS冲洗两次,用胰酶消化细胞（尽可能温和）；3.再次用完全培养液悬浮细胞,将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中,用滴管轻轻吹打混匀.4.在每支冻存管中加入1ml细胞液,密封后标记冻存细胞名称和冻存日期.5.冻存步骤的细致直接关系到细胞复苏时的活力,如果有程序降温器（放在-80℃冰箱过夜,放入液氮罐）最好；或者可以在4℃,2h；然后转到-20℃,2h；-80℃,2h；放入液氮罐.这是我实验中用的protocol,
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